第一、檢測(cè)器的維護(hù)和保養(yǎng)

 

1.檢測(cè)器是高效液相色譜儀器的數(shù)據(jù)收集部分，由很多的電子和光學(xué)元件組成。禁止拆卸更動(dòng)儀器內(nèi)部元件防止損壞或影響準(zhǔn)確度。

 

2.儀器內(nèi)部的流通池是流動(dòng)相流過(guò)的元件，樣品的干凈程度和微生物的生長(zhǎng)都可能污染流通池，導(dǎo)致無(wú)法檢測(cè)或檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)，所以在使用了一段時(shí)間以后要先用水沖洗流通池和管路再換有機(jī)溶劑沖洗。

 

3.當(dāng)儀器檢測(cè)數(shù)據(jù)出現(xiàn)明顯波動(dòng)，基線(xiàn)噪音變大時(shí)要沖洗儀器管路沖洗后如果還是沒(méi)有改善就應(yīng)該檢測(cè)氘燈能量，如果能量不足就因更換新的氘燈。

 

4.儀器在每次使用完了以后都要用水和一定濃度的有機(jī)溶劑沖洗管路，保證下次使用時(shí)管路和系統(tǒng)的清潔。

 

第二、高壓恒流泵的維護(hù)和保養(yǎng)

 

1.高壓恒流泵為整個(gè)色譜系統(tǒng)提供穩(wěn)定均衡的流動(dòng)相流速，保證系統(tǒng)的穩(wěn)定運(yùn)行和系統(tǒng)的重現(xiàn)性。高壓輸液泵由步進(jìn)電機(jī)和柱塞等組成，高壓力長(zhǎng)時(shí)間的運(yùn)行回逐漸磨損泵的內(nèi)部結(jié)構(gòu)。在升高流速的時(shí)候應(yīng)梯度勢(shì)升高，最好每次升高0.2ml/min當(dāng)壓力穩(wěn)定時(shí)再升高，如此反復(fù)直到升高到所需流速。

 

2，在儀器使用完了以后，要及時(shí)清晰管路沖洗泵，保證泵的良好運(yùn)轉(zhuǎn)環(huán)境，保證泵的正常使用壽命。

第三、色譜柱的維護(hù)和保養(yǎng)

 

1.所使用的流動(dòng)相均應(yīng)為HPLC級(jí)或相當(dāng)于該級(jí)別的，在配置過(guò)程中所有非HPLC級(jí)的試劑或溶液均經(jīng)0.45um薄膜過(guò)濾。而且流動(dòng)相使用前都經(jīng)過(guò)超聲儀超聲脫氣后才使用。

 

2.所使用的水必須是經(jīng)過(guò)蒸餾純化后再經(jīng)過(guò)0.45um水膜過(guò)濾后使用，所有試液均新用新配。并且在進(jìn)樣的樣品都必須經(jīng)過(guò)0.45um薄膜針筒過(guò)濾后進(jìn)樣。

 

3.本公司檢驗(yàn)項(xiàng)目中所使用到的最大流速為1.0ml/min，所以流速提升過(guò)程應(yīng)是梯度提升，不存在流速的突升突降。

 

4.在儀器檢測(cè)完了后，均使用水：甲醇=90：10清洗了管路和色譜柱1小時(shí)以上，使用水：甲醇=90：10保存管路和色譜柱40分鐘以上。

 

高效液相色譜儀注意事項(xiàng)

液相色譜是指樣品組分在柱填料和流動(dòng)相之間進(jìn)行的物質(zhì)交換以達(dá)到分離的目的因此流動(dòng)相要求具有以下特點(diǎn)：

 

純度流動(dòng)相在使用前必須使用高效液相色譜儀試劑和過(guò)濾器去除顆粒雜質(zhì)和其他物質(zhì)（用0.45um或更細(xì)的膜過(guò)濾）雜質(zhì)在色譜柱上的積累將影響色譜柱的使用壽命。

 

溶解度樣品的溶解度應(yīng)適當(dāng)。如果溶解度不好，樣品會(huì)在柱頭沉淀，不僅影響提純分離，而且縮短柱的使用壽命。

 

低粘度（小于2cp）高粘度的溶劑會(huì)影響溶質(zhì)的擴(kuò)散傳質(zhì)，降低塔效，增加塔壓降，延長(zhǎng)分離時(shí)間。選擇沸點(diǎn)低于100℃的流動(dòng)相。

 

樣品易于回收應(yīng)選擇揮發(fā)性溶劑。

 

當(dāng)流動(dòng)相pH值用于反相色譜分離弱酸（3≤pKa≤7）或弱堿（7≤pKa≤8）樣品時(shí)，控制樣品組分離解的技術(shù)，提高組分在固定相上的保留率和改善峰型被稱(chēng)為反相離子抑制技術(shù)。對(duì)于弱酸，流動(dòng)相的pH值越小，組分的K值就越大。當(dāng)pH值遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于弱酸的pKa值時(shí)，弱酸主要以分子形式存在，但對(duì)于弱堿性，相反是真實(shí)的分析弱酸樣品時(shí)流動(dòng)相通常加入少量弱酸一般為50mmol/L磷酸鹽緩沖液和1%醋酸溶液；分析弱堿樣品時(shí)流動(dòng)相通常加入少量弱堿一般為50mmol/L磷酸鹽緩沖液和30mmol/L三乙胺溶液。